apendicele 3

3. Reacții de culoare la proteinele

Reacțiile de culoare sunt folosite pentru a determina substanțele naturale de proteine, identificarea proteinei și determinarea compoziției lor de aminoacizi în diferite fluide biologice. În practica clinică de laborator, aceste metode sunt folosite pentru a determina cantitatea de proteină din sânge aminoacizi plasma acizi în sânge și urină, pentru detectarea ereditare si dobandite metabolism in patologii neonatale.

reacția biuret la legătura peptidică.

Ea se bazează pe capacitatea legăturilor peptidice (-CO-NH-), pentru a forma un sulfat de cupru într-un mediu bazic compuși complecși colorați, dintre care intensitatea culorii depinde de lungimea lanțului polipeptidic. Soluția de proteină dă o culoare albastru-violet.

1) albus de ou, 1% proteine ​​soluție (ou de pui filtrat prin tifon și se diluează cu apă distilată 1:10);

2) NaOH, soluție 10%;

3) Cu (OH) 2, 1% soluție.

Cursul de determinare. În a face tubul 5 picături de soluție de proteine ​​de ou, 3 picături de NaOH, 1 Cu (OH) 2 a fost agitată picătură. Conținutul tubului de testare devine de culoare albastru-violet.

REZUMAT reacție este formarea unui compus colorat în albastru și purpuriu și ninhidrină constând în produși de hidroliză aminoacizi. Această reacție este caracteristică în poziția amino în prezent în aminoacizii naturali și proteine.

1) albus de ou, soluție de 1%;

2) ninhidrină soluție apoasă 0,5%

Cursul de determinare. În a face tubul 5 picături de soluție de proteine ​​de ou, apoi 5 picaturi ninhidrină, amestecul a fost încălzit la reflux. Se pare de culoare roz-violet, care trece timpul în albastru-violet.

Când a adăugat la soluția de proteină, acid azotic concentrat și încălzirea colorația galbenă apare, trecând în prezența alcaliilor în portocaliu. REZUMAT reacție constă în nitrarea inelului benzenic aminoacidul ciclic azotic pentru a forma compușii nitro pentru a precipita. Reacția indică prezența aminoacizilor ciclici în proteină.

1) albus de ou, soluție de 1%;

2) acid azotic concentrat;

3) NaOH, soluție 10%.

Cursul de determinare. La 5, în picături, soluție albuș se adaugă 3 picături de acid azotic (atenție!) Este încălzit. Se pare precipitat galben. După răcire (de preferință în precipitat) 10 picături de NaOH, o culoare portocalie.

Triptofanul aminoacizi într-un mediu acid, care interacționează cu aldehide acide, produse de condensare formează o culoare roșu-violet.

1) proteina din ou nediluat

2) un concentrat (acid acetic glacial);

3) acid sulfuric concentrat.

Cursul de determinare. Pentru o proteină, în picături, a adăugat 10 picături de acid acetic. Bascularea peretelui tubului s-a adăugat cu precauție, în picături, 0,5 ml de acid sulfuric, astfel încât lichidul nu este amestecat. Pe picioare tuburile în marginea lichid apare inel roșu-purpuriu.

Aminoacizii conținând sulfhidril - SH, supus la hidroliză alcalină cu sulfură de sodiu Na 2 S. Acestea din urmă, care interacționează cu plumbite de sodiu (format în timpul reacției între acetat de plumb și NaOH), formează un precipitat de sulfură de plumb PbS negru sau maro.

1) albus de ou, soluție de 1%;

2) reactiv (până la 5% soluție de acetat de plumb Foll a fost adăugat un volum egal de soluție de NaOH 30% pentru a dizolva precipitatul format).

Cursul de determinare. La 5 soluție de proteină, în picături, a adăugat 5 picături de reactiv Foll și încălzite 2-3 min. După un repaus de 1-2 minute. Se pare precipitat negru sau maro.